Lyofilisatie, ook bekend als vriesdrogen, is een proces dat wordt gebruikt voor het conserveren van biologisch materiaal door het verwijderen van de water uit het monster, waarbij het monster eerst wordt ingevroren en vervolgens onder vacuüm op zeer lage temperatuur wordt gedroogd temperaturen. Gevriesdroogde monsters kunnen veel langer worden bewaard dan onbehandelde monsters.
Waarom wordt lyofilisatie gebruikt?
Lyofilisatie, of vriesdrogen van bacteriële culturen, stabiliseert de culturen voor langdurige opslag en minimaliseert de schade die kan worden veroorzaakt door het monster strikt te drogen. Veel micro-organismen overleven goed wanneer ze worden gevriesdroogd en kunnen na langdurige opslag gemakkelijk worden gerehydrateerd en gekweekt in kweekmedia.
Lyofilisatie wordt ook gebruikt in de biotechnologie en biomedische industrieën om vaccins, bloedmonsters te bewaren, gezuiverde eiwittenen ander biologisch materiaal.
Deze korte laboratoriumprocedure kan worden gebruikt met elke in de handel verkrijgbare vriesdroger om uw cultuurcollectie te behouden.
Het proces
Het proces van vriesdrogen is eigenlijk een toepassing van een fysiek fenomeen dat sublimatie wordt genoemd: de overgang van een stof van vaste naar gasvormige toestand, zonder eerst door de vloeistof te gaan fase. Tijdens het vriesdrogen wordt het water in het bevroren monster verwijderd als waterdamp, zonder eerst het monster te ontdooien.
Veelgemaakte fouten
Een van de meest voorkomende fouten bij het vriesdrogen is het niet kennen van het smeltpunt van uw monster, waardoor het moeilijk is om de juiste vriesdroger te kiezen. Uw monsters kunnen tijdens het proces smelten. Een andere veelgemaakte fout is te denken dat kouder beter is bij vriesdrogen op een vriesdroger van het planktype. Tijdens primair drogen moet u de schaptemperatuur net onder de eutectische temperatuur van het monster zetten. Er moet net voldoende warmte zijn om de moleculen van het monster te laten bewegen, maar om smelten te voorkomen.
Een derde fout is het gebruik van de verkeerde apparatuur voor uw monsters. Omdat vriesdrogers in een groepsomgeving worden gebruikt, moet u het volgende weten voordat u er een koopt:
- Hoeveel vocht wordt gelyofiliseerd
- Wat is het monster (en de eutectische temperatuur)
- Hoe de vriesdroger correct te gebruiken
Als het apparaat niet correct wordt gebruikt, kan het alle monsters verpesten. Dat brengt ons bij een andere veelgemaakte fout: het niet onderhouden van de vacuümpomp. De pomp moet in uitstekende staat verkeren om de lyofilisatie te laten werken. Door de pomp 30 minuten voor en na het vriesdroogproces open te laten lopen met de gasballast, wordt de levensduur van de pomp verlengd. Door de gasballast te openen, worden verontreinigingen uit de pomp verwijderd om schade aan interne componenten te voorkomen. U moet de pompolie vaak controleren op verkleuring en deeltjes en de olie indien nodig verversen. Regelmatige olieverversing zorgt ervoor dat de pomp tijdens het vriesdrogen op optimaal vacuüm trekt.
Ten slotte kan het een grote fout zijn om de verkeerde accessoires voor vriesdrogen te hebben voor uw lyofilisatieproces. Heeft u een stopmonster nodig onder uw vacuüm? Dan is een stopkamer nodig. Vriesdrogen in kolven? Zorg dan voor een droogkamer met poorten.
Door de bovenstaande fouten te vermijden, kunt u uw vriesdroger en pomp beter verzorgen en krijgt u betere monsters wanneer uw vriesdrogen is voltooid.
Referenties
Labconco Nieuws. "Top 5 fouten gemaakt in het lyofilisatieproces."